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从天山中国一号冰川沉积层样品中,以蓝白斑法初筛、测低温下的相对酶活复筛,获得产低温β-半乳糖苷酶的菌株.通过两级筛选,获得产低温乳糖酶的菌株24株,其中菌株LW097所产β-半乳糖苷酶在低温下的相对酶活最高.进一步通过形态、生理生化试验及16S r DNA测序分析,将该菌株鉴定为嗜冷杆菌(Cryobacterium sp.).结果显示,该菌株在以4%(m/V)的乳糖为碳源,以胰蛋白胨+酵母浸粉为组合氮源的发酵培养基中,16℃培养84 h产酶酶活最高达2.12±0.09U/m L.对该菌株所产β-半乳糖苷酶的酶学性质进行分析发现,其最适反应p H为6.0,最适反应温度为30℃,20℃相对酶活为72.4%,4℃时酶活性仍能保持62.7%;该β-半乳糖苷酶的低温稳定性较好,对热处理敏感,60℃处理4 h酶活几乎消失;1 mmol/L Na+和Ca2+对该酶活性基本无抑制作用.本研究表明菌株Cryobacterium sp. LW097所产β-半乳糖苷酶是典型的低温β-半乳糖苷酶,其酶学特性具备在乳品低温加工领域应用的潜力.(图11表3参39)

期刊论文 2019-02-11 DOI: 10.19675/j.cnki.1006-687x.2018.12017

从天山中国一号冰川沉积层样品中,以蓝白斑法初筛、测低温下的相对酶活复筛,获得产低温β-半乳糖苷酶的菌株.通过两级筛选,获得产低温乳糖酶的菌株24株,其中菌株LW097所产β-半乳糖苷酶在低温下的相对酶活最高.进一步通过形态、生理生化试验及16S r DNA测序分析,将该菌株鉴定为嗜冷杆菌(Cryobacterium sp.).结果显示,该菌株在以4%(m/V)的乳糖为碳源,以胰蛋白胨+酵母浸粉为组合氮源的发酵培养基中,16℃培养84 h产酶酶活最高达2.12±0.09U/m L.对该菌株所产β-半乳糖苷酶的酶学性质进行分析发现,其最适反应p H为6.0,最适反应温度为30℃,20℃相对酶活为72.4%,4℃时酶活性仍能保持62.7%;该β-半乳糖苷酶的低温稳定性较好,对热处理敏感,60℃处理4 h酶活几乎消失;1 mmol/L Na+和Ca2+对该酶活性基本无抑制作用.本研究表明菌株Cryobacterium sp. LW097所产β-半乳糖苷酶是典型的低温β-半乳糖苷酶,其酶学特性具备在乳品低温加工领域应用的潜力.(图11表3参39)

期刊论文 2019-02-11 DOI: 10.19675/j.cnki.1006-687x.2018.12017

从天山中国一号冰川沉积层样品中,以蓝白斑法初筛、测低温下的相对酶活复筛,获得产低温β-半乳糖苷酶的菌株.通过两级筛选,获得产低温乳糖酶的菌株24株,其中菌株LW097所产β-半乳糖苷酶在低温下的相对酶活最高.进一步通过形态、生理生化试验及16S r DNA测序分析,将该菌株鉴定为嗜冷杆菌(Cryobacterium sp.).结果显示,该菌株在以4%(m/V)的乳糖为碳源,以胰蛋白胨+酵母浸粉为组合氮源的发酵培养基中,16℃培养84 h产酶酶活最高达2.12±0.09U/m L.对该菌株所产β-半乳糖苷酶的酶学性质进行分析发现,其最适反应p H为6.0,最适反应温度为30℃,20℃相对酶活为72.4%,4℃时酶活性仍能保持62.7%;该β-半乳糖苷酶的低温稳定性较好,对热处理敏感,60℃处理4 h酶活几乎消失;1 mmol/L Na+和Ca2+对该酶活性基本无抑制作用.本研究表明菌株Cryobacterium sp. LW097所产β-半乳糖苷酶是典型的低温β-半乳糖苷酶,其酶学特性具备在乳品低温加工领域应用的潜力.(图11表3参39)

期刊论文 2019-02-11 DOI: 10.19675/j.cnki.1006-687x.2018.12017

【目的】对新疆冰川冰缘地区冻土中筛选出的具有良好产低温淀粉酶能力的菌株进行分子生物学鉴定,分析其酶学特性。【方法】用种子培养液活化菌株提取基因组DNA进行PCR扩增,将扩增成功菌株的PCR产物测序结果通过NCBI数据库比对,对冻土中产低温淀粉酶菌株的16S rDNA序列用MegAlign Fasta软件进行系统发育分析。利用Yoo改良法测低温淀粉酶酶活力。【结果】菌株A-2,A-3,A-4经16S rDNA序列分析获得的序列与数据库中解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens strain NBRC 15535 16S ribosomal RNA,partial sequence(NR 04145))比对相似率达到99%。该菌株产生的低温淀粉酶的最适作用温度为30℃,最适pH为6。【结论】菌株A-2,A-3,A-4均属解淀粉芽孢杆菌。

期刊论文 2013-08-11
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