目的 探讨羟基积雪草酸(madecassic acid,MA)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及自噬的影响。方法 将MCF-7细胞分为阴性对照组、不同浓度的MA(80、100、120、140、160μmol/L)组、不同浓度的他莫昔芬(10、20、30、40、50、35μmol/L)组,干预24、36、48 h。初步确定MA发挥抗乳腺癌作用的最佳浓度和最佳时间后,采用MTT法检测细胞活力,计算相应的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值;流式细胞术检测细胞凋亡;JC-1荧光探针检测线粒体膜电位变化;Western blot法检测细胞增殖蛋白细胞核抗原蛋白(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、自噬蛋白苄氯素-1(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/Ⅰ(microtubule-associated protein1 light chain 3Ⅱ/Ι,LC3Ⅱ/Ι)、螯合体1(protein 62,p62)的蛋白相对表达水平。透射电镜检测自噬小体。结果 ...
目的 探讨羟基积雪草酸(madecassic acid,MA)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及自噬的影响。方法 将MCF-7细胞分为阴性对照组、不同浓度的MA(80、100、120、140、160μmol/L)组、不同浓度的他莫昔芬(10、20、30、40、50、35μmol/L)组,干预24、36、48 h。初步确定MA发挥抗乳腺癌作用的最佳浓度和最佳时间后,采用MTT法检测细胞活力,计算相应的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值;流式细胞术检测细胞凋亡;JC-1荧光探针检测线粒体膜电位变化;Western blot法检测细胞增殖蛋白细胞核抗原蛋白(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、自噬蛋白苄氯素-1(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/Ⅰ(microtubule-associated protein1 light chain 3Ⅱ/Ι,LC3Ⅱ/Ι)、螯合体1(protein 62,p62)的蛋白相对表达水平。透射电镜检测自噬小体。结果 ...
旨在探讨积雪草酸(AA)对脂多糖(LPS)诱导肉鸡肾细胞凋亡和自噬的影响。将40只1日龄肉鸡适应性饲养至7日龄,并随机分为对照组(Con)、LPS组(LPS)、低剂量AA组(LPS+AA 15 mg·kg-1)和高剂量AA组(LPS+AA 30 mg·kg-1)。AA预处理组的肉鸡连续14 d每日灌胃相应剂量AA。除Con组,其余组肉鸡在第16、18和20日龄时腹腔注射0.5 mg·kg-1剂量的LPS构建急性肾损伤(AKI)模型;第21日龄时处死肉鸡并采集肾组织样品。苏木精-伊红(HE)染色观察肾组织病理学变化;计算肾脏系数和检测肾组织抗氧化酶水平;实时荧光定量(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)分别检测凋亡和自噬相关基因及蛋白的表达;免疫组织化学和免疫荧光检测细胞色素c(Cytc)和微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)蛋白在肾组织的表达与分布;TUNEL染色检测肾细胞凋亡率。结果发现,AA可减轻LPS诱导的肉鸡肾病理损伤,显著降低肾脏系数和肾组织丙二醛(MDA)含量,显著升高谷胱甘肽过氧化...
旨在探讨积雪草酸(AA)对脂多糖(LPS)诱导肉鸡肾细胞凋亡和自噬的影响。将40只1日龄肉鸡适应性饲养至7日龄,并随机分为对照组(Con)、LPS组(LPS)、低剂量AA组(LPS+AA 15 mg·kg-1)和高剂量AA组(LPS+AA 30 mg·kg-1)。AA预处理组的肉鸡连续14 d每日灌胃相应剂量AA。除Con组,其余组肉鸡在第16、18和20日龄时腹腔注射0.5 mg·kg-1剂量的LPS构建急性肾损伤(AKI)模型;第21日龄时处死肉鸡并采集肾组织样品。苏木精-伊红(HE)染色观察肾组织病理学变化;计算肾脏系数和检测肾组织抗氧化酶水平;实时荧光定量(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)分别检测凋亡和自噬相关基因及蛋白的表达;免疫组织化学和免疫荧光检测细胞色素c(Cytc)和微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)蛋白在肾组织的表达与分布;TUNEL染色检测肾细胞凋亡率。结果发现,AA可减轻LPS诱导的肉鸡肾病理损伤,显著降低肾脏系数和肾组织丙二醛(MDA)含量,显著升高谷胱甘肽过氧化...
目的 本实验拟探讨虾青素纳米乳液对SD大鼠全层皮肤缺损创面的愈合和愈合后瘢痕增生的影响及其初步机制。方法 24只雄性SD大鼠,用随机数字表法分为空白对照组、模型组、积雪苷霜软膏阳性对照组和虾青素纳米乳液实验组,每组6只,采用全层皮肤缺损法进行动物模型制作,其中空白对照组仅做禁食、麻醉及剃毛处理,而不进行实际的造模手术。药物干预阳性对照组和实验组在术后次日分别涂覆500 mg积雪苷霜软膏和等量虾青素纳米乳液于每个创面,每日2次,并在术后第1、3、6、7、9、11、14、18、21、28天测量其创面或瘢痕面积,第2、3、4周时进行稍大于造模范围皮肤全层的取材,利用苏木精-伊红(HE)、马苏(Masson)染色分别观察不同时期皮肤组织中成纤维细胞和胶原纤维的形态、分布、含量等;蛋白质免疫印迹(Western blot, WB)检测第4周皮肤组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、白介素6(IL-6)以及凋亡自噬相关因子。对数据行单因素方差分析处理。结果 在整个实验过程中,给药组较模型组愈合更快,瘢痕愈合质量更高;第4周时,虾青素纳米乳液给药组成纤维细胞数密度低于积雪苷霜组(P<0.05...
目的 本实验拟探讨虾青素纳米乳液对SD大鼠全层皮肤缺损创面的愈合和愈合后瘢痕增生的影响及其初步机制。方法 24只雄性SD大鼠,用随机数字表法分为空白对照组、模型组、积雪苷霜软膏阳性对照组和虾青素纳米乳液实验组,每组6只,采用全层皮肤缺损法进行动物模型制作,其中空白对照组仅做禁食、麻醉及剃毛处理,而不进行实际的造模手术。药物干预阳性对照组和实验组在术后次日分别涂覆500 mg积雪苷霜软膏和等量虾青素纳米乳液于每个创面,每日2次,并在术后第1、3、6、7、9、11、14、18、21、28天测量其创面或瘢痕面积,第2、3、4周时进行稍大于造模范围皮肤全层的取材,利用苏木精-伊红(HE)、马苏(Masson)染色分别观察不同时期皮肤组织中成纤维细胞和胶原纤维的形态、分布、含量等;蛋白质免疫印迹(Western blot, WB)检测第4周皮肤组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、白介素6(IL-6)以及凋亡自噬相关因子。对数据行单因素方差分析处理。结果 在整个实验过程中,给药组较模型组愈合更快,瘢痕愈合质量更高;第4周时,虾青素纳米乳液给药组成纤维细胞数密度低于积雪苷霜组(P<0.05...
旨在探讨积雪草酸(asiatic acid, AA)预处理对LPS诱导雏鸡急性肝损伤的影响及AA对AMPK-mTOR通路与肝细胞自噬的作用。60只1日龄雏鸡适应性饲养7 d后,随机分为对照组、LPS组、LPS+AA(低、中、高剂量)预处理组和AA对照组。除对照组和LPS组,AA低、中、高剂量预处理组和AA对照组使用相应剂量的AA预处理14 d外,对照组和LPS组灌胃相同剂量的羧甲基纤维素钠悬浮液。AA预处理组和LPS组在16,18和20日龄腹腔注射LPS(0.5 mg/kg),21 d时采集肝脏样品,-80℃保存,用于后续试验。通过HE染色评估鸡肝细胞的病理损伤,试剂盒检测肝脏组织中AST和ALT的活力,RT-qPCR、Western blot检测自噬相关基因和蛋白的表达;免疫组化、免疫荧光分别检测Beclin 1、LC3-Ⅱ在肝组织的表达。结果显示:LPS导致肉鸡肝脏出现细胞肿胀、大面积空泡变性以及炎性细胞浸润;而AA预处理有效缓解了LPS引起病理变化,下调mTOR的基因和蛋白表达,提高AMPK、ATG5、Beclin 1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的基因和蛋白表达;Beclin 1和L...
旨在探讨积雪草酸(asiatic acid, AA)预处理对LPS诱导雏鸡急性肝损伤的影响及AA对AMPK-mTOR通路与肝细胞自噬的作用。60只1日龄雏鸡适应性饲养7 d后,随机分为对照组、LPS组、LPS+AA(低、中、高剂量)预处理组和AA对照组。除对照组和LPS组,AA低、中、高剂量预处理组和AA对照组使用相应剂量的AA预处理14 d外,对照组和LPS组灌胃相同剂量的羧甲基纤维素钠悬浮液。AA预处理组和LPS组在16,18和20日龄腹腔注射LPS(0.5 mg/kg),21 d时采集肝脏样品,-80℃保存,用于后续试验。通过HE染色评估鸡肝细胞的病理损伤,试剂盒检测肝脏组织中AST和ALT的活力,RT-qPCR、Western blot检测自噬相关基因和蛋白的表达;免疫组化、免疫荧光分别检测Beclin 1、LC3-Ⅱ在肝组织的表达。结果显示:LPS导致肉鸡肝脏出现细胞肿胀、大面积空泡变性以及炎性细胞浸润;而AA预处理有效缓解了LPS引起病理变化,下调mTOR的基因和蛋白表达,提高AMPK、ATG5、Beclin 1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的基因和蛋白表达;Beclin 1和L...