目的 探讨羟基积雪草酸(madecassic acid,MA)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及自噬的影响。方法 将MCF-7细胞分为阴性对照组、不同浓度的MA(80、100、120、140、160μmol/L)组、不同浓度的他莫昔芬(10、20、30、40、50、35μmol/L)组,干预24、36、48 h。初步确定MA发挥抗乳腺癌作用的最佳浓度和最佳时间后,采用MTT法检测细胞活力,计算相应的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值;流式细胞术检测细胞凋亡;JC-1荧光探针检测线粒体膜电位变化;Western blot法检测细胞增殖蛋白细胞核抗原蛋白(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、自噬蛋白苄氯素-1(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/Ⅰ(microtubule-associated protein1 light chain 3Ⅱ/Ι,LC3Ⅱ/Ι)、螯合体1(protein 62,p62)的蛋白相对表达水平。透射电镜检测自噬小体。结果 ...
目的 探讨羟基积雪草酸(madecassic acid,MA)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及自噬的影响。方法 将MCF-7细胞分为阴性对照组、不同浓度的MA(80、100、120、140、160μmol/L)组、不同浓度的他莫昔芬(10、20、30、40、50、35μmol/L)组,干预24、36、48 h。初步确定MA发挥抗乳腺癌作用的最佳浓度和最佳时间后,采用MTT法检测细胞活力,计算相应的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值;流式细胞术检测细胞凋亡;JC-1荧光探针检测线粒体膜电位变化;Western blot法检测细胞增殖蛋白细胞核抗原蛋白(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、自噬蛋白苄氯素-1(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/Ⅰ(microtubule-associated protein1 light chain 3Ⅱ/Ι,LC3Ⅱ/Ι)、螯合体1(protein 62,p62)的蛋白相对表达水平。透射电镜检测自噬小体。结果 ...
目的 研究积雪草酸(AA)对前列腺癌DU145细胞增殖和凋亡的影响。方法 以不同浓度AA进行药物干预DU145细胞,MTT法检测细胞活力变化;显微镜观察细胞形态改变;Hoechst染色及Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;Western Blot法检测细胞线粒体凋亡相关蛋白表达变化;试剂盒检测细胞Caspase 3活性变化。结果 与空白组比较,AA能够有效抑制前列腺癌DU145细胞的增殖,显著诱导细胞凋亡(P<0.01),显著提升细胞Bax、Cleaved Caspase 3、Cyt-C蛋白表达和Bax/Bcl-2比值(P<0.05,P<0.01),显著降低Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),显著促进细胞Caspase 3活化(P<0.05,P<0.01)。与AA组比较,Caspase 3抑制剂Z-VAD-FMK能够显著抑制AA诱导的细胞Caspase 3活化(P<0.05),显著逆转AA诱导的细胞增殖抑制(P<0.05,P<0.01)。结论 AA能够通过抑制DU145细胞增殖及诱导线粒体途径凋亡发挥抗前...
目的 研究积雪草酸(AA)对前列腺癌DU145细胞增殖和凋亡的影响。方法 以不同浓度AA进行药物干预DU145细胞,MTT法检测细胞活力变化;显微镜观察细胞形态改变;Hoechst染色及Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;Western Blot法检测细胞线粒体凋亡相关蛋白表达变化;试剂盒检测细胞Caspase 3活性变化。结果 与空白组比较,AA能够有效抑制前列腺癌DU145细胞的增殖,显著诱导细胞凋亡(P<0.01),显著提升细胞Bax、Cleaved Caspase 3、Cyt-C蛋白表达和Bax/Bcl-2比值(P<0.05,P<0.01),显著降低Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),显著促进细胞Caspase 3活化(P<0.05,P<0.01)。与AA组比较,Caspase 3抑制剂Z-VAD-FMK能够显著抑制AA诱导的细胞Caspase 3活化(P<0.05),显著逆转AA诱导的细胞增殖抑制(P<0.05,P<0.01)。结论 AA能够通过抑制DU145细胞增殖及诱导线粒体途径凋亡发挥抗前...
目的 探讨积雪草酸对缺血性脑卒中(IS)大鼠神功功能的保护作用及其机制。方法 75只健康、雄性清洁级Wistar大鼠随机分为假手术组,脑缺血组,积雪草酸-L组(50 mg/kg),积雪草酸-M组(100 mg/kg),积雪草酸-H组(200 mg/kg)。各组通过大脑中动脉线栓阻塞法构建缺血性脑卒中模型后给予积雪草酸治疗。3 d后评估大鼠神经功能。循序处死大鼠,取脑组织开展梗死体积、脑水肿、血脑屏障完整性检测,免疫荧光染色与Western blot试验。结果 与脑缺血组相比,积雪草酸可明显降低缺血性脑卒中大鼠神经功能评分(P<0.05),减少伊文思蓝穿透量(P<0.05)、脑水肿程度(P<0.05)、脑梗死体积(P<0.05)。积雪草酸可增加大鼠缺血区CD31/Ki67双阳性染色(P<0.05),且脑组织中VEGFA与Ang1蛋白表达水平上调(P<0.05),Claudin-5与ZO-1表达增加(P<0.05)。结论 积雪草酸对缺血性脑卒中具有治疗作用,其机制可能是提高VEGFA与Ang1表达,促进血管内皮细胞增殖,帮助血脑屏障结构的修复。
目的 探讨积雪草酸对缺血性脑卒中(IS)大鼠神功功能的保护作用及其机制。方法 75只健康、雄性清洁级Wistar大鼠随机分为假手术组,脑缺血组,积雪草酸-L组(50 mg/kg),积雪草酸-M组(100 mg/kg),积雪草酸-H组(200 mg/kg)。各组通过大脑中动脉线栓阻塞法构建缺血性脑卒中模型后给予积雪草酸治疗。3 d后评估大鼠神经功能。循序处死大鼠,取脑组织开展梗死体积、脑水肿、血脑屏障完整性检测,免疫荧光染色与Western blot试验。结果 与脑缺血组相比,积雪草酸可明显降低缺血性脑卒中大鼠神经功能评分(P<0.05),减少伊文思蓝穿透量(P<0.05)、脑水肿程度(P<0.05)、脑梗死体积(P<0.05)。积雪草酸可增加大鼠缺血区CD31/Ki67双阳性染色(P<0.05),且脑组织中VEGFA与Ang1蛋白表达水平上调(P<0.05),Claudin-5与ZO-1表达增加(P<0.05)。结论 积雪草酸对缺血性脑卒中具有治疗作用,其机制可能是提高VEGFA与Ang1表达,促进血管内皮细胞增殖,帮助血脑屏障结构的修复。
目的 观察积雪草酸对前列腺癌细胞DU145和PC-3增殖、迁移、侵袭的影响,并探讨其对上皮间质转化(EMT)的影响和潜在调控机制。方法 体外培养DU145和PC-3细胞,以不同浓度积雪草酸干预后,采用MTT法检测其对细胞活力的影响;通过克隆形成实验检测其对细胞克隆形成能力的影响;通过细胞划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验观察低浓度积雪草酸(10、20μmol·L-1)对转化生长因子β1(TGF-β1,5 ng·mL-1)诱导后DU145和PC-3细胞迁移、侵袭的影响;采用Western Blot法检测DU145细胞的血管内皮生长因子A(VEGFA)和EMT相关纤维连接蛋白(Fibronectin)、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)、Snail及E-钙黏蛋白(E-Cadherin)的表达情况。结果 积雪草酸可浓度及时间依赖性地抑制DU145和PC-3细胞增殖,干预24、48、72 h后的IC50值分别为29.10、17.52、11.53μmol·L-1和27....
目的 观察积雪草酸对前列腺癌细胞DU145和PC-3增殖、迁移、侵袭的影响,并探讨其对上皮间质转化(EMT)的影响和潜在调控机制。方法 体外培养DU145和PC-3细胞,以不同浓度积雪草酸干预后,采用MTT法检测其对细胞活力的影响;通过克隆形成实验检测其对细胞克隆形成能力的影响;通过细胞划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验观察低浓度积雪草酸(10、20μmol·L-1)对转化生长因子β1(TGF-β1,5 ng·mL-1)诱导后DU145和PC-3细胞迁移、侵袭的影响;采用Western Blot法检测DU145细胞的血管内皮生长因子A(VEGFA)和EMT相关纤维连接蛋白(Fibronectin)、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)、Snail及E-钙黏蛋白(E-Cadherin)的表达情况。结果 积雪草酸可浓度及时间依赖性地抑制DU145和PC-3细胞增殖,干预24、48、72 h后的IC50值分别为29.10、17.52、11.53μmol·L-1和27....
目的观察积雪草酸对健康人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)增殖、凋亡及成骨分化的作用,探究其作用机制。方法采用不同浓度积雪草酸处理健康hPDLCs,CCK8法检测不同时间点积雪草酸对hPDLCs的增殖能力的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和茜素红染色检测细胞成骨分化情况,qRT-PCR法检测细胞ALP、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白2(bone morphogenic protein 2,BMP2)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator nuclear factorκB ligand,RANKL)mRNA表达水平;Western blotting法检细胞中B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein ge...
目的观察积雪草酸对健康人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)增殖、凋亡及成骨分化的作用,探究其作用机制。方法采用不同浓度积雪草酸处理健康hPDLCs,CCK8法检测不同时间点积雪草酸对hPDLCs的增殖能力的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和茜素红染色检测细胞成骨分化情况,qRT-PCR法检测细胞ALP、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白2(bone morphogenic protein 2,BMP2)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator nuclear factorκB ligand,RANKL)mRNA表达水平;Western blotting法检细胞中B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein ge...